為確??諝馕⑸锊蓸悠鳂颖咎幚淼臏?zhǔn)確性,需從采樣前準(zhǔn)備、采樣過程控制、樣本保存運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)室檢測到質(zhì)量監(jiān)控全流程實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)化操作。以下是分階段的關(guān)鍵措施及技術(shù)要點(diǎn):
一、采樣前的設(shè)備校準(zhǔn)與環(huán)境控制
1.采樣器性能校準(zhǔn)
流量校準(zhǔn):使用皂膜流量計(jì)(如TSI4140)校準(zhǔn)采樣泵流量,誤差需≤±5%(ISO14698-1標(biāo)準(zhǔn)要求)。例如,100L/min的采樣器需在30-150L/min范圍內(nèi)分段校準(zhǔn),每10L/min記錄一次偏差。
體積計(jì)量驗(yàn)證:通過稱重法校準(zhǔn)采樣體積(如水收集法),1m³采樣量的誤差應(yīng)<±10L。
沖擊效率測試:使用標(biāo)準(zhǔn)粒子(如1-5μm聚苯乙烯微球)測試采樣器對微生物的捕獲效率,需達(dá)到≥90%(參考NIEHS空氣采樣器驗(yàn)證方案)。
2.采樣環(huán)境預(yù)處理
采樣點(diǎn)消毒:用75%乙醇擦拭采樣器外殼及采樣口,作用10分鐘后風(fēng)干,避免表面微生物污染樣本。
背景污染控制:采樣前30分鐘停止人員走動(dòng),開啟空氣凈化設(shè)備(如HEPA過濾),使背景菌落數(shù)<50CFU/m³(GB/T18204.1-2013標(biāo)準(zhǔn))。
二、采樣過程中的標(biāo)準(zhǔn)化操作
1.無菌操作規(guī)范
人員防護(hù):穿戴無菌實(shí)驗(yàn)服、手套(如醫(yī)用丁腈手套),采樣時(shí)距離采樣口≥30cm,避免呼吸或體表脫落微生物污染。
采樣頭更換:每批次采樣前更換無菌采樣頭(如撞擊式采樣器的培養(yǎng)皿需提前滅菌,121℃高壓蒸汽滅菌20分鐘)。
2.采樣參數(shù)控制
采樣時(shí)間:根據(jù)預(yù)期濃度調(diào)整采樣時(shí)長,確保平板菌落數(shù)在30-300CFU之間(CLSIM22-A3標(biāo)準(zhǔn))。例如,高污染環(huán)境(如醫(yī)院病房)采樣10分鐘,潔凈室采樣30分鐘。
采樣高度:環(huán)境監(jiān)測時(shí)采樣口距地面1.2-1.5m(模擬呼吸帶),工業(yè)場景需根據(jù)氣流方向調(diào)整(如距污染源上風(fēng)側(cè)1m處)。
三、樣本保存與運(yùn)輸?shù)姆€(wěn)定性保障
1.溫度與時(shí)間控制
短期保存:采樣后立即將樣本置于4℃冷藏(如便攜式恒溫箱),保存時(shí)間≤4小時(shí)(GB4789.2-2022要求),避免微生物過度繁殖或死亡。
長途運(yùn)輸:使用干冰(-78℃)或冰袋(0-4℃)維持低溫,同時(shí)用防震材料包裹,防止培養(yǎng)皿晃動(dòng)導(dǎo)致菌落重疊。
2.防污染包裝
雙層密封:樣本先裝入無菌自封袋,再放入防漏金屬罐(如鋁制容器),外層貼生物危害標(biāo)識。
濕度控制:在包裝內(nèi)放置硅膠干燥劑,使相對濕度<30%,避免培養(yǎng)基受潮霉變。